期刊简介
本刊为国内外发行的神经外科专业学术期刊，该杂志由第四军医大学主办，办刊宗旨为：贯彻党和国家卫生工作方针及政策，坚持理论与实践、普及与提高相结合的方式，反映我国及世界神经外科学的基础研究和临床技术的重大进展，促进国内、外神经外科学的学术交流。本刊主要涉及神经外科各类疾病的病因及病理、诊断与治疗方面，同时兼顾头颈外科、颌面外科、耳鼻咽喉科、神经影像学等学科的内容。本杂志为国际标准大16开本，105g进口铜版纸印刷，栏目设有述评、专家论坛、论著、论著摘要、经验交流、技术改进、短篇与个案、会议纪要、专题笔谈、讲座、综述、学术动态及教学园地等。
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- 杂志名称：中华神经外科疾病研究杂志
- 主管单位：第四军医大学
- 主办单位：第四军医大学第一附属医院
- 国际刊号：1671-2897
- 国内刊号：61-1384/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国核心期刊遴选数据库期刊收录：国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
PYGO2基因RNA干扰真核表达载体的构建
王海东；苏新辉；王占祥；马永会；谭国伟
关键词：Pygo2, RNA干扰, 真核表达载体, 构建
摘要：目的 构建PYGO2基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体.方法 以PYGO2为靶基因,以pSUPER.puro质粒为载体,设计构建重组体,根据基因库(GenBank)提供的PYGO2基因核苷酸序列,在http://www.ambion.com网站上使用siRNA Target Finder软件进行目的基凶的siRNA序列对应DNA的设计与筛选,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pSUPER.puro中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析,将重组的pSUPER.puro-PYGO2质粒转染胶质瘤C6细胞48 h,检测其对该细胞PYGO2蛋白的影响.结果 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体显著降低胶质瘤细胞PYGO2的蛋白表达,重组载体构建成功.结论 利用RNAi技术可成功构建抑制PYGO2表达的siRNA真核表达载体.
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