期刊简介
本刊为国内外发行的神经外科专业学术期刊，该杂志由第四军医大学主办，办刊宗旨为：贯彻党和国家卫生工作方针及政策，坚持理论与实践、普及与提高相结合的方式，反映我国及世界神经外科学的基础研究和临床技术的重大进展，促进国内、外神经外科学的学术交流。本刊主要涉及神经外科各类疾病的病因及病理、诊断与治疗方面，同时兼顾头颈外科、颌面外科、耳鼻咽喉科、神经影像学等学科的内容。本杂志为国际标准大16开本，105g进口铜版纸印刷，栏目设有述评、专家论坛、论著、论著摘要、经验交流、技术改进、短篇与个案、会议纪要、专题笔谈、讲座、综述、学术动态及教学园地等。
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- 杂志名称：中华神经外科疾病研究杂志
- 主管单位：第四军医大学
- 主办单位：第四军医大学第一附属医院
- 国际刊号：1671-2897
- 国内刊号：61-1384/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国核心期刊遴选数据库期刊收录：国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中)
稳定整合靶向性MSP58基因RNA干涉载体的胶质瘤细胞系建立
林伟；章翔；张璟；张健；刘军叶；王西玲
关键词：RNA干涉, 微小球蛋白, 胶质瘤
摘要：目的 探讨经载体介导的RNA干涉法建立抑制癌基因微小球蛋白(58-kDa microspherule protein,MSP58)表达的稳转细胞系的可行性.方法 根据MSP58 cDNA编码序列,设计并合成针对MSP58基因的特异性RNA干涉片断,并将其克隆入pSilencer3.1-H1neo干涉载体中,构建MSP58基因shRNA真核表达载体pSilencer-MSP58.重组载体pSilencer-MSP58和pSilencer3.1-H1neo阴性对照载体pSilencer3.1-H1neo Negtive经脂质体LipofectamineTM2000介导法转染胶质瘤细胞株U251;转染细胞经过G418筛选,采用逆转录酶-多聚酶链反应(Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)、Western blot方法分别在mRNA水平和蛋白水平检测、筛选G418抗性的克隆细胞.结果 成功构建了MSP58基因shRNA真核表达载体pSilencer-MSP58,经酶切、测序鉴定证实克隆正确.获得了稳定转染pSilencer-MSP58载体的6个胶质瘤细胞株.结论 特异性shRNA能够明显抑制MSP58基因在U251细胞中的表达,并建立了稳定整合有靶向MSP58基因RNA干涉载体的胶质瘤细胞系,这为进一步研究MSP58在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础.
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